Sam Winchester (Jared Padalecki) e Dean Winchester (Jensen Ackles) são dois irmãos caçadores de demônios, fantasmas, monstros e diversas outras criaturas sobrenaturais. Eles foram criados apenas pelo pai, John (Jeffrey Dean Morgan), que, após o assassinato de Mary (Samantha Smith), sua esposa e mãe dos meninos, orientou os filhos a matar qualquer ser estranho que encontrem durante a noite. Os irmãos, que haviam seguido caminhos de vida distintos, se unirão após um terrível acidente com o pai.